اطلاعیه

کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب NS3 helicase ویروس هپاتیت C

کد محصول PZ29

تعداد صفحات: ۹۶ صفحه فایل WORD

قیمت: ۲۰۰۰۰ تومان

فهرست مطالب

۱.فصل اول(مقدمه و مروری بر مطالعات گذشته)  ۱
۱.۱ مقدمه ۲
۲.۱ ویروس هپاتیتC(HCV) ۳
۳.۱ سیر ایجاد ‍ژنوتیپ ۴
۴.۱ ژنوم و پروتئوم ویروس HCV ۶
۵.۱ ساختار RNA داخلی و عناصر همانندسازی Cis-acting ۹
۶.۱ چرخه تکثیر ویروس ۱۰
۷.۱ مکانیسم آسیب کبدی با واسطه ایمنی ۱۲
۸.۱ تظاهرات بالینی بیماری هپاتیت C ۱۳
۱.۸.۱ هپاتیت C حاد ۱۴
۲.۸.۱ هپاتیت مزمن ۱۵
۳.۸.۱ فیبروز ۱۵
۴.۸.۱ سیروز ۱۵
۵.۸.۱ سرطان سلولهای کبدی (HCC) ۱۶
۹.۱ تظاهرات خارج کبدی ۱۶
۱۰.۱ تشخیص ۱۷
۱۱.۱ پیشگیری ۱۷
۱۲.۱ درمان ۱۸
۱.۱۲.۱ درمان با اینترفرون آلفا ۱۸
۲.۱۲.۱ اینترفرون با اثر طولانی ۱۸
۳.۱۲.۱ درمان توأم ۱۹
۱۳.۱ اپیدمیولوژی ۲۰
۱۴.۱ پروتئین NS3 ویروس هپاتیتC ۲۱

۲. فصل دوم(مواد و روشها) ۲۳
۱.۲ اهداف ۲۴
۱.۱.۲ هدف کلی ۲۴
۲.۱.۲ اهداف جزئی ۲۴
۲.۲ استخراج ژنوم HCV از پلاسمای بیمار آلوده به HCV با ساب تایپ ۱a ۲۴
۳.۲ بررسی RNA استخراج شده به وسیله خواندن میزان OD با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر  ۲۵
۴.۲ انجام RT-PCR و تولید cDNA ژنوم HCV ۲۶
۵.۲ تکثیر ناحیه ژن NS3 helicase ویروس هپاتیت C با استفاده  از روش PCR داخلی(Nested PCR) ۲۸
۶.۲ خالص سازی محصول PCR ۳۳
۷.۲ لایگیشن محصول PCR و وکتور بیانی pET102/D.TOPO ۳۳
۸.۲ باکتری های مورد استفاده در تحقیق ۳۷
۱.۸.۲ سویه DH5α ۳۷
۲.۸.۲ سویه BL21(DE3) ۳۷
۹.۲ تهیه باکتری های مستعد و انجام ترانسفورمیشن ۳۸
۱.۹.۲ روش ایجاد باکتری های مستعد ۳۹
۲.۹.۲ روش انجام ترانسفورمیشن ۴۰
۱۰.۲ استخراج پلاسمید ۴۱
۱۱.۲ بیان پروتئین NS3 helicase ۴۳
۱۲.۲ استخراج و تخلیص پروتئین نوترکیب از باکتری با استفاده از ستون نیکل ۴۳
۱.۱۲.۲ استخراج پروتئین از باکتری ۴۳
۲.۱۲.۲ تخلیص پروتئین نوترکیب ۴۴
۱۳.۲ سنجش غلظت پروتئین ها  ۴۵
۱۴.۲ الکتروفورز پروتئین ها در ژل پلی آکریلامید در حضور سدیم دودسیل سولفات(SDS-PAGE) ۴۶
۱۵.۲ رنگ آمیزی ژل پلی آکریلامید با کوماسی بلو R-250 ۴۹
۱۶.۲ تست وسترن بلاتینگ ۴۹
۱۷.۲ تست الیزا ۵۱
۱.۱۷.۲ انواع روش های الیزا ۵۱
۲.۱۷.۲ بهینه کردن شرایط آزمایش ۵۲
۳.۱۷.۲ مراحل تست الیزا ۵۳

۳.فصل سوم (نتایج و یافته ها) ۵۵
۱.۳ استخراج RNA ویروس و سنتز Cdna ۵۶
۲.۳  تکثیر ژن NS3 helicase با روش Nested- PCR ۵۶
۳.۳ نتایج لایگیشن و ترانسفورم وکتور بیانی pET102/D.TOPO ۵۷
به داخل باکتری و تکثیر و تلخیص آن ۵۸
۴.۳ نتایج حاصل از استخراج پلاسمید  ۵۹
۵.۳ نتایج حاصل از انجام Sequencing قطعه ژن NS3 helicase ۵۹
۶.۳ ترانسفورم پلاسمید استخراج شده به میزبان بیانی (BL21) ۶۰
۷.۳ القای باکتری،استخراج و تلخیص پروتئین نوترکیب NS3 helicase ۶۰
۸.۳ الکتروفورز محلول های پروتئینی جدا سازی شده بر روی ژل SDS-PAGE ۶۱
۹.۳ روش وسترن بلاتینگ  ۶۲
۱۰.۳ تست الیزا ۶۴

۴. فصل چهارم(بحث، نتیجه گیری و پیشنهادها) ۶۵
۱.۴ بحث ۶۶
۲.۴ استفاده از Directional TOPO Cloning برای بیان مستقیم ژن NS3 helicase ۶۷
۳.۴ بیان و خالص سازی پروتئین نوترکیب  NS3 helicase ۶۸
۴.۴ روش وسترن بلاتینگ ۶۹
۵.۴ تست الیزا ۶۹
۶.۴ نتیجه گیری ۶۹
۷.۴ پیشنهادها ۷۰

فهرست منابع ۷۱
چکیده انگلیسی  ۷۶

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

Time limit is exhausted. Please reload the CAPTCHA.